首页 > 资讯 > 如何解决曾引发轩然大波的亚硝胺杂质问题

出自识林

2019-07-06

亚硝胺 — 如何解决这些在制药领域不受欢迎的客人

（本文作者：Aloka Srinivasan，Lachman Consultants 公司副总裁，原文发表于 Contract Pharma）

亚硝胺是一类致癌物质，由仲胺、酰胺、氨基甲酸酯、尿素衍生物与亚硝酸盐或其它含氮物质与 +3 价氮反应形成。¹ 在酸性pH值下，前体的共同性质和亚硝化反应易于生成的性质，使得亚硝胺成为消费品和药品领域普遍存在和不受欢迎的客人之一，不请自来，消耗我们的资源，而且很难清除。

亚硝胺的致癌性质已有 50 多年的历史²，并且有几种亚硝胺已被检测到具有致癌性并且被证明有活性，亚硝基二甲胺（NDMA）和亚硝基二乙胺（NDEA）以及N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸（NMBA）是亚硝胺中众所周知的几种。³ 根据 ICH M7(R1)指南，基于啮齿动物的致癌性和致突变性数据，亚硝胺被归类为 1 类杂质“已知致突变致癌物”。⁴ 基于所研究的一些物种的数据，国际癌症研究机构（IARC）将它们归类为 2A – 可能的致癌物⁵。ICH M7(R1) 1 类发现限制了安全性评估方法/控制选项，这要求这些物质只能处于或低于化合物特定的可接受限度。药物中亚硝胺的限度只能来自啮齿类动物研究致癌性数据，因为药理学关注阈值（TTC）方法在世界上大多数监管机构是不被接受的。⁴

亚硝胺最近在制药领域重新浮出水面，原因是美国 FDA 和其它国际机构在血管紧张素 II 受体阻滞剂（ARB）中发现痕量这些化合物。这些药通常被称为沙坦类，包括缬沙坦、氯沙坦、厄贝沙坦、阿齐沙坦、奥美沙坦、依普罗沙坦、坎地沙坦和替米沙坦。截至目前，缬沙坦和氯沙坦受影响最严重，多批受影响批次已被召回。⁷ 此外，所有获得 FDA 批准的沙坦类药物的制药公司都已被要求评估其产品中亚硝胺的存在并将发现传达给 FDA。⁷ 此外，FDA 一直致力于解决沙坦类产品中的亚硝胺问题，并让公众了解其正在采取的行动。⁷ FDA 的行动包括召回几批 ARB，提供 ARB 中亚硝胺的可接受限度，并为申办人提供敏感性分析方法。⁸ 根据 ICH M7(R1)，使用来自啮齿类动物致癌性研究（调整为每十万人终生每日暴露的癌症风险）的 TD 50 值来计算 NDMA 和 NDEA 的安全水平。FDA 目前提供的 NDMA 的安全限度为 96 ng/天，NDEA 为 26.5 ng/天。⁶ 对于 NMBA，最近确定的安全水平为 96 ng/天。⁶

事件回顾

• 【缬沙坦危机引发 FDA 着手修订 GMP 2019/03/26】
• 【厄贝沙坦进入缬沙坦杂质事件波及范围 2018/11/01】
• 【美国欧盟大面积禁止进口华海产品 2018/09/29】
• 【缬沙坦杂质癌症风险高还是低，立场不同态度自然不同 2018/09/18】
• 【FDA 局长与药品中心主任再次就缬沙坦事件发表联合声明 2018/08/31】
• 【缬沙坦事件中美国 FDA 耐人寻味的行动 2018/08/23】
  
• 【缬沙坦风波再起，FDA 公布两份华海检查 483 2018/08/11】
  
• 【缬沙坦基因毒性杂质事件继续，FDA 宣布自愿召回清单 2018/07/16】
  

然而，对于氯沙坦，FDA 目前接受 NMBA 的临时标准为 9.82 ppm，而不是之前基于 TDI（每日总摄入量） 96 ng/天的 0.96 ppm 的限度。⁶ NMBA 在限定时间内不超过 9.82 ppm 的可接受性的基础是基于 FDA 的调查结果，FDA 发现该临时标准在六个月时间段内的癌症风险与终生暴露在 0.96 ppm 的 NMBA 中的癌症风险相比没有显著差异。⁶ 制定该临时标准的期望是防止氯沙坦的短缺，并且将为申办人提供几个月的时间来制定程序以确保他们能够向美国公众提供不含 NMBA 的氯沙坦。总体而言，关于 ARB 中亚硝胺的意外发现使制药行业（尤其是 API 生产商和 FDA）的工作量呈指数增长。也让消费者对他们多年来一直服用的降压药的安全性感到疑虑。

虽然整个行业都在屏住呼吸，等待有关 ARB 中亚硝胺的最终处置方式，但也引发了有关如何预测并在未来避免这种情况的问题。根据沙坦类的结构和在其中发现的亚硝胺的性质，可以得出结论，亚硝胺的来源不是沙坦类的降解或生产过程。来源是在大多数沙坦类生产过程中使用的试剂和溶剂中可能存在的杂质，在某些情况下，溶剂回收不当从而导致杂质的产生。⁷亚硝酸钠是用于生产大多数沙坦类药物的常用试剂。

如前所述，亚硝酸钠在酸性 pH 下与任何胺、酰胺等在溶剂、回收溶剂和试剂中可能存在的杂质易发生反应，从而形成亚硝胺。因此，制造商必须了解其生产过程中亚硝胺形成的可能来源，并添加适当的控制措施，以降低形成这些致癌杂质的可能性。制药行业需要把眼光放远，理解试剂和溶剂的质量（即使是在生产过程中相对上游使用的那些溶剂）对于确保最终原料药的质量至关重要。

亚硝胺和药物中其它致突变杂质引发的问题是该做些什么以及从哪里开始以预测和预防这类情况的发生。在亚硝胺的情况下，以下是原料药制造商在生产过程中可以采取的主动步骤的例子，可以显著降低亚硝胺作为杂质存在的可能性：

• 无论药品是仲胺还是药物中的任何中间体或杂质是仲胺时，在生产工艺研发期间寻找相应的亚硝胺是有益的。
• 当在药物生产过程的任何步骤中使用亚硝酸钠时，应基于起始物料、试剂和溶剂对所有可能的亚硝胺进行广泛评估。如果在生产工艺的上游使用亚硝酸钠，则应采取措施确保非常有效地洗脱。
• 当在药物生产中使用 DMF（二甲基甲酰胺）、DMA（二甲基乙酰胺）或 DEA（二乙基乙酰胺）等溶剂时，寻找潜在的亚硝胺（如 NDMA 和 NDEA）是明智的。
• 当试剂具有仲胺结构时（例如，在许多合成过程中用作连接基团的二乙醇胺或其衍生物），寻找与这些胺相关的亚硝胺是明智的。⁹
• N-烷基酰胺、氨基甲酸酯可以被亚硝化。¹ 因此，应该认识到其形成亚硝胺的可能性，以防万一酰胺和氨基甲酸酯在原料药合成方案中用作试剂或作为中间体产生。
• 如果工艺流程后期的中间体被视为监管起始物料（RSM）并从外部供应商处购买，则应验证是否在 RSM 生产过程的任何步骤中使用了亚硝酸钠。

截至目前，对于制药行业来说，了解亚硝胺何时何处可能出现在药品中似乎是一项艰巨的任务。然而，通过更好地了解它们的前体和促使其形成的条件，行业或许能够实现减少甚至消除在药品中出现亚硝胺的可能性。

参考资料
1. Loeppky, R., N.; “Nitrosamine and N-Nitroso Compound Chemistry and Biochemistry: Advances and Perspectives”; ACS Symposium Series, Vol. 553, Chapter 1, pp. 1–18, March 28, 1994.
2. Preussmann, R., et. al.; “N-Nitroso Carcinogens”; ACS Monograph; 1984, 182 (Chem. Carcinog., 2nd edition, Vol. 2), pp. 643-828
3. Lijinsky, W., et. al.; “Comparative carcinogenesis by some aliphatic nitrosamines in Fischer rats”; Cancer Letters, Vol. 14 (3), pp. 297-302, December 1981.
4. International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use; “ICH Harmonised Guideline - Assessment And Control Of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk, M7(R1)”; March 31, 2017, url.
5. International Agency for Research on Cancer; “IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans: Smokeless Tobacco and Some Tobacco-specific N-Nitrosamines”; Volume 89, 2007, https://monographs.iarc.fr/iarc-monographs-on-the-evaluation-of-carcinogenic-risks-to-humans-32/.
6. U.S. Food and Drug Administration; “FDA updates on angiotensin II receptor blocker (ARB) recalls including valsartan, losartan and irbesartan”;; https://www.fda.gov/drugs/drugsafety/ucm613916.htm; updated as of April 4, 2019.
7. U.S. Food and Drug Administration; “FDA News Release: FDA provides update on its ongoing investigation into ARB drug products; reports on finding of a new nitrosamine impurity in certain lots of losartan and product recall; March 1, 2019; https://www.fda.gov/NewsEvents/Newsroom/PressAnnouncements/ucm632425.htm.
8. U.S. Food and Drug Administration; “Combined Direct Injection N-Nitrosodimethylamine (NDMA) and NNitrosodiethylamine (NDEA) Impurity Assay by GC/MS;; https://www.fda.gov/downloads/Drugs/DrugSafety/UCM623578.pdf; web accessed April 8, 2019.
9. Loeppky, R. N., Erb, E., Srinivasan, A., and Yu, L.; “Nitrosamine and N-Nitroso Compound Chemistry and Biochemistry: Chemistry of Putative Intermediates in Bioactivation of -Oxidized Nitrosamines”; ACS Symposium Series, Vol. 553, Chapter 33, pp. 334-336, March 28, 1994.